根據(jù)培養(yǎng)目的需要選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)

由于微生物營養(yǎng)類型復雜，不同微生物有不同的營養(yǎng)要求。因此，要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)，配制針對性強的培養(yǎng)基。

自養(yǎng)微生物有較強的合成能力，能以簡單的無機物如co2和無機鹽合成復雜的細胞物質(zhì)。因此，培養(yǎng)自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基應由簡單的無機物組成。

異養(yǎng)微生物的合成能力較弱，不能以CO2作為碳源或主要碳源，故應在培養(yǎng)基中至少添加一種有機物。

注意營養(yǎng)物質(zhì)的濃度與配比要合適

微生物只有在營養(yǎng)物質(zhì)濃度及其比例合適時才能良好生長。營養(yǎng)物質(zhì)濃度過低不能滿足現(xiàn)生長需要，過高又抑制其生長。例如，適量的蔗糖是異養(yǎng)微生物的良好碳源和能源，但高濃度蔗糖則抑制菌體生長。金屬離子是微生物生長礦質(zhì)養(yǎng)分，但濃度擴大，尤其是重金屬離子，反而抑制其生長，甚至產(chǎn)生殺菌作用。

控制培養(yǎng)基的條件

(1) 控制培養(yǎng)基的pH 配制培養(yǎng)基必須根據(jù)微生物的特點調(diào)節(jié)pH。各大類微生物要求的適宜生長pH范圍不同。如霉菌與酵母菌一般為5.0-6.0, 細菌為6.5-7.5.放線菌為7.5-8.5.培養(yǎng)基的pH與其C/N有極大關系。C/N高的培養(yǎng)基，例如培養(yǎng)各種真菌的培養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)后其pH明顯下降;相反，C/N低的培養(yǎng)基，例如培養(yǎng)一般細菌的培養(yǎng)基， 經(jīng)培養(yǎng)后，其pH則明顯上升。這是由于營養(yǎng)物質(zhì)的消耗與代謝產(chǎn)物的積累，改變了培養(yǎng)基的pH，若不及時控制，將導致菌體生長停止。

(2)調(diào)節(jié)氧化還原電位(Eh) 各種微生物對培養(yǎng)基的Eh要求不同。適宜好氧微生物生長的Eh值一般為+0.3~+0.4V，厭氧微生物只能在+0.1V以下生長，因此，培養(yǎng)好氧微生物必須保證氧的供應，可在培養(yǎng)基中加入氧化劑提高Eh值。

(3)調(diào)節(jié)滲透壓 多數(shù)微生物能耐受較大范圍滲透壓的變化。培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度過大，會使?jié)B透壓過高，使細胞發(fā)生質(zhì)壁分離而抑制微生物生長。低滲溶液則使細胞吸水膨脹易破裂，因此，配制培養(yǎng)基時要掌握營養(yǎng)物質(zhì)的濃度。常在培養(yǎng)基中加人適量的Nacl以提高滲透壓。

原料來源的選擇力求節(jié)約

配制培養(yǎng)基還應遵循力求節(jié)約的原則，盡量選用價格便宜、來源方便的原料。特別是在工業(yè)發(fā)酵中，培養(yǎng)基用量大，更應注意利用低成本的原料，降低產(chǎn)品成本。

滅菌處理

為了避免雜菌污染，獲得微生物純培養(yǎng)物，培養(yǎng)基必須及時嚴格滅菌。通常采用高壓蒸汽滅菌。一般培養(yǎng)基用0. IMPa (121℃)維持15 ~ 30min即可滅菌。長時間的高溫滅菌會使某些不耐熱的物質(zhì)破壞，如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖。因此，含糖培養(yǎng)基常用0.05MPa (110℃) 滅菌20 ~ 30min某些對糖類要求更高的培養(yǎng)基，可先將糖過濾除菌或間歇滅菌，再與其他已滅菌的成分混合。長時間高溫滅菌也會使磷酸鹽、碳酸鹽與鈣、鎂鐵等陽離子形成難溶性化合物而產(chǎn)生沉淀。為了防止這類沉淀發(fā)生，可將這些物質(zhì)分別滅菌，冷卻后再混合；也可在培養(yǎng)基中加入少量整合劑(0.01%乙二胺四乙酸，即EDTA)使金屬離子形成可溶性絡合物，防止沉淀的產(chǎn)生。高壓蒸汽滅菌一般使培養(yǎng)基 pH降低， 應在配制培養(yǎng)基時加以調(diào)節(jié)。